中文摘要：

如何提高载体的靶向性和安全性是目前困扰肝癌基因治疗的两大难题，本课题通过建立一种高靶向性、高安全性的新型非病毒载体体系，研究其抗癌药理学作用，在肝癌基因治疗的靶向性理论研究中寻求一种新的尝试。研究内容包括构建含有细胞穿膜肽和肝细胞膜亲和蛋白片段基因的重组子并表达成基因治疗蛋白运载体Ⅰ；构建含有TK杀伤基因、肝癌细胞选择性启动子和EGFP报告基因的DNA载体Ⅱ。将带正电荷的蛋白运载体Ⅰ和带负电荷

结论摘要：

如何提高载体的靶向性和安全性是目前困扰肝癌基因治疗取得进展的两个难题，本研究拟构建并表达含有细胞穿膜肽和肝细胞膜亲和片段的载体Ⅰ；同时构建DNA 载体Ⅱ（含有TK 杀伤基因、在肝癌细胞中选择性表达的AFP 启动子和EGFP 报告基因）。将带正电荷的蛋白载体Ⅰ和带负电荷的DNA载体Ⅱ结合，制备一种新型的双靶向性载体复合物。载体Ⅰ可提高载体复合物的转染效率及在肝细胞中的富集度；载体物Ⅱ可实现杀伤基因特异的在肝癌细胞中表达，实现特异杀伤肝癌细胞。本实验以DNaseⅠ和无细胞血浆分别检验载体复合物的稳定性，以EGFP 表达情况检验其转染效率，比较肝细胞和肝癌细胞的凋亡及死亡率来检测其特异性杀伤肝癌细胞的作用。本研究有希望提供一种较目前基因治疗载体更高靶向性、更安全的新型非病毒载体，在肝癌的基因治疗的靶向性理论研究中寻求一种新的尝试。