视网膜色素上皮细胞(RPE)完整的单层和正常极向排列对其行使清除视觉细胞脱落的膜盘碎屑,并且分隔高血管的脉络膜和光感受器的屏障功能都非常重要。其功能障碍会导致严重视网膜疾病。目前RPE移植是治疗此病的有效方法。RPE细胞移植因分散植入不能建立有效连接和异体RPE细胞移植存在排斥反应的问题,限制了这项手术的开展。为此,实现永久替代细胞移植就成了亟待解决的问题。本课题将大鼠骨髓间充质干细胞提取、鉴定后在体外诱导分化,应用免疫组化、PCR、Western blot等方法比较MSC诱导前后与自体RPE细胞中Mertk基因的表达,结合特异及非特异性吞噬结果,首次证明MSC表达Mertk基因,并具有特异性吞噬ROS的功能,与自体RPE细胞比较无显著性差异;将MSC制备成无支架复层细胞膜片,体外检测具备吞噬功能及细胞间连接;首次采用经巩膜外路视网膜下移植模型将MSC无支架复层细胞膜片移植于视网膜下腔。体内观察1个月后FFA检测证明移植细胞膜片具备屏障功能,冰冻切片检测Mertk、ZO-1、Occludin的表达阳性,从而证明该细胞膜片具备一定的特异性吞噬和屏障功能,可以行使保护视网膜神经层的作用。
英文主题词Bone-Marrow Mesenchymal Stem Cells; phagocytosis; transplantation into subretinal space; Structural remodeling