中文摘要：

脂多糖LPS是内毒素血症及脓毒症最主要的致病因子，可通过激活Toll样受体4（TLR4）跨膜信号通路，活化宿主免疫细胞，促进细胞因子和炎症介质的过度释放。本项目通过对前期工作已获得的亲代EBP和LBP的LPS结合位点片段一级结构分析，根据蛋白结构与功能的关系，结合生物信息学设计构建了一组新型内毒素结合肽突变体，分别应用分子克隆表达（快速定点突变法）和固相合成两种途径纯化突变体mEBPs并进行体外拮抗LPS活性比较，筛选获得目的突变体mEBP9。活性鉴定结果证实Fmoc固相合成的mEBP9可通过直接中和LPS及竞争性阻断LBP与LPS结合，在体外抑制LPS诱导的过度炎症反应，并对LPS诱导的小鼠急性肺损伤和烧伤合并内毒素血症小鼠模型具有保护效应。进一步通过在mEBP9N末端或C末端分别引入1个半胱氨酸，采用单甲氧基聚乙二醇马来酰亚胺（mPEG-MAL5000）进行定点聚乙二醇修饰，经体外活性比较显示N末端修饰的mEBP9稳定性明显增强且拮抗LPS活性大部分保留。上述研究结果为以抑制LBP的催化放大效应为靶标的脓毒症防治策略提供了新的实验依据。