中文摘要：

探讨内源性神经干细胞治疗实验性大鼠脊髓损伤的可行性；启动Wnt信号通路刺激内源性神经干细胞增殖、分化，建立神经干细胞治疗实验性大鼠脊髓损伤的新方法。分离培养胚胎大鼠脊髓神经干细胞（载体神经干细胞）；抽提大鼠胚脑总RNA；RT-PCR制备Wnt-3a cDNA；构建pSecTag B真核表达载体；Western blot鉴定Wnt-3a信号蛋白表达；转染载体神经干细胞，培养并筛选稳定表达Wnt-3a

结论摘要：

应用内源性神经干细胞修复脊髓损伤是本课题的研究中心。定向调控内源性神经干细胞向神经元分化是利用内源性神经干细胞治疗脊髓损伤的关键。既往的研究发现Wnt信号通路能刺激胚脑源性的神经干细胞向神经元分化并抑制其向胶质细胞分化。本课题设计在脊髓损伤后激活Wnt信号通路并检验其对内源性神经干细胞增殖分化的影响及对脊髓功能恢复的作用。实验首先构建Wnt-3a真核表达载体并转染成体脊髓内源性神经干细胞。体外培养1周后发现转染组神经元的分化率（38.16%）较两对照组（20.22%；18.11%）增高。然后将Wnt-3a信号蛋白注入损伤的脊髓中，分别于术后24h、1w、2w、3w及4w行BBB评分与免疫组化分析。发现对照组BBB评分在2w达到最高值，而实验组在4w 后BBB评分仍继续增加。神经元的分化数量在2w时实验组（20.5±5.2/400倍视野）较对照组（12.5±4.3/400倍视野）明显增多，但在4w时实验组（9.8±4.5/400倍视野）与对照组（7.8±3.6/400倍视野）差异不明显。课题首次报道了Wnt信号通路促进脊髓功能恢复的作用，建立内源性神经干细胞治疗脊髓损伤的新方法。