中文摘要：

GCRV为双链RNA病毒。TLR3基因作为识别进入内体中双链RNA的模式识别受体。本研究通过同源克隆及RACE技术获得了草鱼TLR3基因cDNA全长序列。筛选BAC文库获得gDNA序列。草鱼TLR3在肝胰脏中的表达在GCRV感染后显著上调，而对GCRV不感染的鲤鱼TLR3在肝胰脏中的表达被显著抑制。构建过表达载体，转染草鱼肾细胞系(CIK)，GCRV感染，抗病毒能力高于对照，抗病毒效应分子表达量升高；用化学合成的siRNA转染CIK，抗病毒能力低于对照。通过DNA池测序发现了13个多态位点，关联分析发现2个多态位点及1个单体型与草鱼抗GCRV显著相关。通过TLR3基因甲基化检测，发现启动子区甲基化修饰水平与GCRV感染显著相关。TLR22基因是识别胞外双链RNA的模式识别受体。本研究获得了草鱼TLR22的cDNA和gDNA序列及在GCRV刺激下体内外的表达模式，发现了5个多态位点，其中1个多态位点与GCRV抗性显著相关。本研究还发现了识别病毒单链RNA的草鱼TLR7和TLR8对GCRV体内外感染也表现出显著的变化，说明草鱼机体通过TLR基因家族多个成员共同识别GCRV并激发免疫反应。