本项目将通过农杆菌浸润法在本氏烟上研究水稻条纹病毒(RSV)非结构蛋白 NS3 抑制植物RNA 沉默的致病相关功能,同时也将借助昆虫细胞转染体系进行 NS3 蛋白抑制昆虫细胞 RNA 沉默的分析,并结合 siRNAs 与 miRNAs 的研究以明确 NS3 蛋白在植物和昆虫不同生物模式上抑制 RNA 沉默的异同点;为进一步阐明 NS3 蛋白的致病相关功能,在酵母双杂交体系中筛选来自不同抗性水稻的 cDNA 文库,以 NS3 蛋白为诱饵来钓取与其互作的寄主调控因子,通过调控因子在不同抗性水稻中的表达量分析、以及 RNAi、转基因过量表达技术与生物信息学相关分析来共同验证调控因子的功能;最后综合分析NS3 蛋白抑制寄主基于抗病毒防卫的 RNA 沉默的相关致病功能,并提出抑制 RNA 沉默的模型,也将为其他同类病毒的研究提供一些普适性的规律。
英文主题词rice stripe virus;nonstructural protein NS3;associated-pathogenicity function