目的建立一种新的肝癌循环肿瘤细胞(CTCs)分离/检测系统用于预测肝癌转移复发。方法临床检测样本为5ml外周血,来自于85例HCC患者、37例良性肝病患者、20例健康志愿者以及14例其它类型晚期肿瘤病例。生物素化去唾液酸胎球蛋白作为配体与肝癌细胞结合,然后用抗生物素抗体磁珠进行间接磁性标记,从而磁性捕获循环肝癌细胞。分离到的肝癌细胞用Hep par 1进行免疫荧光染色鉴定。采用Hep3B肝癌细胞掺入试验分析该系统的回收率、敏感度。结果细胞掺入试验显示,在每个掺入水平,HepG2细胞的平均回收率均≥61%。健康志愿者、良性肝病患者以及非肝细胞癌肿瘤病例均未检出CTCs。在85例HCC病例中,CTCs阳性率为81%(69/85),CTCs检出数为19±24个/5 mL外周血。CTCs阳性率和数目与肿瘤大小、门静脉癌栓、TNM分期、Milan标准符合情况等具有显著相关性。部分CTCs具有HER-2基因扩增和TP53基因缺失现象。从分离的CTCs中可检出CD133阳性细胞。结论建立的循环肝癌细胞富集和计数系统具有较高的敏感性和特异性,是一种具有临床应用潜能的循环肝癌细胞检测方法。
英文主题词hepatocellular carcinoma; circulating tumor cells; magnetic cell separation; asialoglycoprotein receptor; ligand-receptor interaciton