通过系统溶剂提取法对大蓟炭各部位进行提取分离,对各提取部位进行止血和抗出血作用倾向研究,筛选出有效部位,再对有效部位进行系统的化学分离,结合药效评价指标,争取发现有效单体化合物,初步阐明大蓟炭止血作用的药效物质基础;通过GC、HPLC、HPLC-MS等方法比较大蓟生品和大蓟炭药效部位在炮制前后成分的变化,并对其他可能的止血成分如鞣质含量和炭素含量进行比较研究,进一步明确大蓟炒炭后化学成分的质变和量变;对药效学筛选出来的有效部位或成分,考察炮制前后其对体内血栓作用以及对血凝系统作用的影响,通过炮制前后成分变化及药效指标差异的关联性分析,初步阐明大蓟炭增强止血作用机制。课题的研究将为大蓟炭炮制提供科学合理的理论依据;为今后类似药物研究提供良好研究思路和技术平台;还可促进中药炮制学科其他领域的发展。
Cirsium japonicum DC.;Carbonized Cirsium japonicum D;processing method;processing mechanism;
课题研究内容围绕文献整理、大蓟炭炮制工艺、大蓟炭药效化学物质基础及大蓟炭止血药效与增效机制四个方面展开。根据中心组合试验设计原理,采用响应面分析方法确定了大蓟炭炮制工艺。比较了不同产地来源的大蓟及大蓟炭化学成分的差异,在对大蓟炮制前后的化学成分比较方面,考察了黄酮类、多糖类及挥发油类化学成分的具体差异。在此基础上进一步采用系统溶剂提取分离方法,从大蓟炭中分离得到14个化合物。在大蓟炭止血与增效药效机制研究方面,不仅从宏观比较了大蓟炭对不同出血小鼠模型的止血与凝血作用,大蓟炭各成分部位的止血、凝血作用,又研究了柳穿鱼叶苷和柳穿鱼黄素的体内吸收情况,以及柳穿鱼叶苷和柳穿鱼黄素对血小板的活化作用。做到了从宏观模型到分子细胞水平全面、系统的阐释大蓟炭止血与增效的炮制机制。课题研究有利于提升中药炮制研究水平,为深入挖掘和传承炮制机制奠定了基础。