高同型半胱氨酸(Hcy)血症是动脉粥样硬化(AS)独立危险因子,而线粒体融合蛋白-2(HSG/Mfn2)是调控细胞增殖的关键基因,且DNA甲基化是基因表达调控的重要方式,但Hcy是否通过HSG/Mfn2 DNA甲基化异常引起VSMCs增殖未见报道。因此本项目拟复制Hcy引起VSMCs增殖动物和细胞模型,实时PCR等检测HSG/Mfn2的变化,分别过表达和沉默HSG/Mfn2,Hcy干预后,观察VSMCs增殖的变化,明确HSG/Mfn2的作用;高通量MethyLight法检测HSG/Mfn2 DNA甲基化的变化,实时PCR等检测DNMTs等调控相关因子的变化,揭示HSG/Mfn2 DNA甲基化在Hcy引起VSMCs增殖中的作用机制;基因重组和RNA干扰技术分别使DNMT1过表达和沉默,明确其是调控DNA甲基化的关键靶点;本课题旨在阐明HSG/Mfn2的作用机制,为Hcy靶向治疗提供实验依据。
英文主题词Homocysteine;HSG/Mfn2;VSMCs Proliferation;DNA methylation;