中文摘要：

肝细胞生长因子(HGF)是一种与多种肿瘤的恶性程度及转移相关的多肽生长因子。我们在前期研究中发现其受体c-Met可被雄激素受体反向调节，去势动物前列腺癌组织中c-Met表达增加。从而推测HGF/c-Met可能在雄激素阻断治疗中被激活并促进肿瘤的进展。阻断HGF/c-Met可成为治疗激素难治性前列腺癌(HRPC)的新手段。由于HGF/c-Met通路在体内涉及基质与肿瘤细胞间的相互作用，传统的靶向抑制剂不能同时阻断小鼠宿主及肿瘤来源的HGF。利用独特的兔杂交瘤技术我们研发了具有与鼠交叉作用的HGF中和抗体，并利用序列导向的方法设计了人源化策略。通过测定抗体在细胞水平对激酶磷酸化、细胞增殖、侵袭性的抑制以及小鼠荷瘤模型中对肿瘤生长、微血管生成、侵袭相关因子等方面的影响，我们深入阐述HGF/c-Met通路在前列腺癌中的机制及与雄激素的关系，为HGF单克隆抗体靶向治疗HRPC提供依据。

结论摘要：

背景肝细胞生长因子(HGF)是一种与多种肿瘤的恶性程度及转移相关的多肽生长因子，HGF/c-Met可能在雄激素阻断治疗中被激活并促进肿瘤的进展。阻断HGF/c-Met可成为治疗激素难治性前列腺癌(HRPC)的新手段。由于HGF/c-Met通路在体内涉及基质与肿瘤细胞间的相互作用，传统的靶向抑制剂不能同时阻断小鼠宿主及肿瘤来源的HGF。方法利用独特的兔杂交瘤技术我们制备一组HGF中和抗体，通过配体受体阻断ELISA实验及在前列腺癌细胞株中抗体对受体c-Met磷酸化的抑制等试验，筛选出具有较强中和作用并且具有鼠交叉活性的抗体进一步开发，并利用序列突变导向的方法进行人源化改造。在激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3及血管内皮细胞HUVEC细胞增殖的抑制试验以及PC-3小鼠荷瘤模型中研究对肿瘤生长、微血管密度的影响。结果我们共筛选到11个可阻断HGF/c-Met结合及在细胞水平中抑制c-Met磷酸化的中和抗体。HGF兔单克隆抗体可抑制内源性c-Met磷酸化及HGF诱导的c-Met磷酸化。HGF兔单克隆抗体可抑制PC-3细胞增殖及HGF依赖的HUVEC细胞增殖。在PC-3移植瘤裸鼠模型中，HGF兔单克隆抗体可显著抑制肿瘤的生长及降低微血管密度。结论我们成功制备一组HGF兔单克隆抗体，筛选的具有较强中和作用并且具有鼠交叉活性的抗体可显著抑制前列腺癌细胞增殖及血管的生成。通过在小鼠荷瘤模型中对肿瘤生长、微血管生成等方面的影响，我们深入阐述抗体阻断HGF/c-Met通路在抑制前列腺癌生长的机制，为HGF单克隆抗体靶向治疗HRPC提供依据。