在前期研究中,我们利用RACE技术获得一条在肝癌组织内高表达的新基因(BC047440),反义技术抑制该基因可明显抑制肝癌细胞的生长,提示该基因可能参与了肝癌的发生过程。本研究成功制备了BC047440兔源多克隆抗体,然后用免疫组化及Western blot方法检测表明,BC047440在肝癌中的表达明显高于癌旁肝组织和正常肝组织(P<0.05);BC047440的高表达与肝细胞癌的侵袭性、转移性增强及患者预后差有着密切的关系。成功构建该基因的siRNA表达质粒,转染HepG2细胞后可导致该基因在mRNA水平表达明显减少;siRNA沉默BC047440表达可以抑制肝癌细胞的增殖,并使HepG2细胞的NF-κB相关蛋白p50含量及NF-κB核转位均明显降低,提示BC047440促进HepG2细胞增殖的调节机制之一可能是通过活化NF-κB信号通路实现。沉默BC047440基因后用基因芯片及蛋白芯片技术检测了相关基因谱及蛋白表达谱的变化,发现有有189个基因及170个蛋白表达上调,79个基因及33个蛋白表达下调,涉及细胞周期、凋亡、信号转导等方面,提示该基因参与HepG2细胞的多种生命活动。
英文主题词BC047440 gene,hepatocellular carcinoma,RNA interference;DNA array;proteinchip