结核病是目前致死人数最多的传染病,卡介苗(BCG)是目前用于结核病(TB)预防的唯一疫苗,但其存在着保护期短、免疫应答较弱以及不能解决隐性感染等问题。本项目比较了结核分枝杆菌中5种Rpf蛋白对MTB休眠菌复苏的作用,从中获得激活休眠菌作用最强的RpfD蛋白,在确定抗此种Rpf蛋白的抗体对MTB毒株H37Rv的生长具有抑制作用的基础上,构建筛选出分泌表达RpfD蛋白的rMV并验证其免疫保护力。在此基础上进一步成功构建分泌表达RpfD的rBCG,并将其与已有的超表达Ag85B的rBCG联合免疫,并对其生物学特性、免疫学特性及对毒株的攻击保护力进行实验研究。本研究获得的分泌表达RpfD的rBCG有可能通过刺激rBCG增长的方式增强表达Ag85B的rBCG的预防保护效果。另外通过研究大肠杆菌和分枝杆菌重组表达的RpfD蛋白在体外刺激MTB的复苏和生长作用,有助于获得MTB快速培养的新试剂,缩短TB实验室检验诊断时间。
英文主题词Mycobacterium tuberculosis; latent bacterium; Rpf; recombinant BCG