双孢蘑菇是我国主要栽培食用菌。双孢蘑菇采收后极易褐变,品质及商品性急剧下降,已成为困扰产业发展的突出问题。多酚氧化酶(PPO)活性是造成双孢蘑菇褐变的关键因素,PPO通过氧化酚类生成褐色物质,使菇体变暗腐烂。因此,揭示双孢蘑菇褐变中PPO的作用机理,对调控PPO活性、抑制酶促褐变,具有重要意义。本项目组在前期研究中,已克隆到2个PPO基因,AbPPO3与AbPPO4,基因表达分析表明此2个基因与双孢蘑菇褐变相关,同时还建立了农杆菌介导的双孢蘑菇转化体系。本项目以双孢蘑菇为研究对象,通过启动子与GUS融合表达确定基因的表达方式,利用PPO反义抑制与超量表达方法验证基因的功能,分析AbPPO3及AbPPO4基因表达与褐变的关系,系统研究PPO基因的功能及其在褐变过程中的作用。通过本项目研究,不仅有助于揭示双孢蘑菇褐变的分子机理,也为双孢蘑菇抗褐变分子育种开辟新途径、新思路,具有重要的创新意义。
英文主题词Agaricus bisporus;PPO promoter;antisense RNA;overexpression;Transcriptome