中文摘要：

缺氧肺动脉高压(PH)致死率很高，制约其有效治疗的原因之一是缺氧肺血管收缩（HPV）的发病机制还不清楚。我们前期的研究发现，线粒体可以通过H2O2调节细胞质游离钙浓度（[Ca2+]i)；急性缺氧时细胞外Ca2+内流及内质网钙库的Ca2+释放均可升高[Ca2+]i进而引起HPV；[Ca2+]i升高又可开放细胞膜钙激活氯通道(ClCa)从而参与HPV。但肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)线粒体感受缺氧的位点、缺氧信息H2O2对下游信号通路的调节机制还不清楚。本研究拟运用激光扫描共聚焦、荧光分光光度法等技术，研究急性缺氧条件下，大鼠PASMCs线粒体H2O2生成量及位点；阐明H2O2对内质网钙库及细胞膜ClCa的影响进而对细胞钙动员的调节机制；阐明H2O2对PASMCs收缩功能的钙敏感性的调节机制。该研究将为肺血管舒缩的反应性寻找有效的调节靶点，并为缺氧PH的治疗提供新的策略。

结论摘要：

背景COPD相关肺动脉高压（PH）发病率及死亡率逐年升高。它主要病理生理基础之一是缺氧肺血管收缩（HPV）。HPV的发病机制还不十分清楚。本组的研究发现，线粒体可以通过ROS（主要是H2O2）调节细胞质游离钙浓度（[Ca2+]i)；急性缺氧细胞外钙内流及内质网钙释放均可升高[Ca2+]i进而引起HPV。但肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)线粒体感受缺氧的位点、缺氧信息H2O2对下游信号通路的调节机制还不清楚。故观察急性缺氧PASMCs线粒体H2O2生成量及位点；H2O2对[Ca2+]i的影响及对PASMCs收缩功能的钙敏感性的调节机制，为缺氧PH的治疗提供新的策略。此外，项目同时开展了COPD相关PH患者部分基因多态性及循环相关标记物的研究等。研究内容 ① 利用动物（鼠）及人PASMCs和肺动脉血管，研究急性缺氧时PASMCs线粒体H2O2的生成量及生成位点；H2O2对[Ca2+]i的影响；急性缺氧时H2O2通过RhoA/ROCK信号通路对PASMCs收缩功能的钙敏感性的影响。② 观察FKBP12.6及HIF-1α基因rs11549467及rs2057482位点的多态性与COPD及PH的关联；血浆血小板平均体积（MPV）、血小板活化因子( PAF) 及血小板活化因子乙水解酶(PAF-AH)等在COPD相关PH中的意义；西地那非对COPD相关PH治疗效果；总结COPD相关PH的临床特点。结果及意义 ①急性缺氧时PASMC线粒体ETC复合体I、II、III前泛半醌位点生成ROS增加，增多的ROS可以引起[Ca2+]升高；高水平的[Ca2+]能引起PASMCs收缩增强；缺氧信息H2O2主要通过激活ROCK信号通路使PASMCs收缩功能增强。提示缺氧环境下线粒体ROS信号通路激活可能是引起PH原因之一。②FKBP12.6对RYR2的调控在COPD患病及急性加重中可能起重要作用，这对进一步研究ROS-内质网RyRs钙动员-肺动脉收缩的调控机制又增加了新依据，使本组成功申请2016年国家自然科学基金（81560014）；HIF-1α基因rs2057482位点与COPD相关PH的易感性相关；血液PAF和PAF-AH等可能参与了COPD相关PH的形成或加重过程；MPV等可作为监测 COPD肺动脉压力及心肺功能受损的指标，这对COPD相关PH的临床诊断、治疗及判断预后有参考价值。