中文摘要：

理想的免疫抑制剂应用不仅需要根据免疫排斥反应的程度或免疫耐受情况，还需要根据患者的易感性规范化用药，但是目前为止仍然没有一种可靠的特异的免疫状态检测方法达到上述要求。本课题着眼于免疫排斥反应的整体过程，利用供体细胞具备移植复合抗原能全面代表移植物抗原特异性的特点，直接利用移植受体体内免疫环境，将适量供体细胞输入受体，通过设置受体自身细胞作为动态内参照来去除检测结果中非特异因素的影响，准确地检测供体复合抗原遭受特异性免疫攻击过程中动态变化情况，从而直观地反应出移植物所受的免疫排斥强度，为移植后免疫抑制剂的个体化应用提供依据。该定量检测方法已经在小动物预实验初步验证。本课题研究不仅有望对于临床移植免疫排斥的定量检测有重要意义，而且对移植免疫耐受的检测及鉴别非特异性因素如感染所致免疫反应有重要作用；对探索新的免疫学定量检测方法研究亦有启迪作用。

结论摘要：

器官移植后必需应用免疫抑制剂防止急性排斥反应的发生，免疫抑制剂通过抑制T细胞和B细胞等靶细胞的细胞增殖、细胞因子合成而起作用。理想的免疫抑制治疗应该在免疫抑制和保持免疫力间取得平衡，因此对于临床医生来说移植患者管理是一件很困难的事。保存受体免疫力，尽可能减小免疫抑制剂用量或诱导免疫耐受一直是移植免疫学家的主要目标，这方面虽然也取得了一些令人兴奋的成果，但是诱导耐受仍然有大量的工作要做，研究诱导免疫耐受方法，尽可能减小免疫抑制的用量，研究检测免疫耐受及免疫力的免疫学方法将是今后 几年器官移植所面临的最重要的挑战。可靠的免疫状态指标可以为免疫抑制剂的使用提供依据，使抑制剂不仅可以根据排斥反应的程度或耐受情况使用，还可以根据患者的易感性规范化用药，由于长期免疫抑制剂治疗所引起的的高发病率和高死亡率，高度期望规范化用药能够实现。但是，尽管通过血液标本或移植物病理分析检测免疫功能已经可以部分了解宿主抗移植物排斥反应，包括了解浸润细胞的表型及功能，T细胞性质的改变、细胞因子及抗体的合成情况等，但是仍然没有一种可靠的特异的排斥反应检测方法。目前临床常用受体免疫状态的监测的方式仍然是临床症状评估结合移植物活检。但是，活组织病理检查对移植物和宿主均是一种损伤性检查，有其固有的局限性。 本课题设计了一种简单的方法，用CFSE标记供体细胞，流式细胞仪检测供体细胞在受体内遭受排斥反应过程，同时设置受体细胞作为内参照。标记的细胞悬液输注给不同的受体，输注后不同时间点采血进行流式细胞分析。这种方法为同种异体移植试验受体免疫状态的监测提供了一种简单有效的方法。同时我们也证实这种方法是一种特异的、敏感的、精确的可用于免疫学定量研究的方法。目前，已经成功建立小鼠、新西兰大白兔的皮肤移植排斥模型；小鼠、新西兰大白兔的免疫学定量检测方法已完成，食蟹猴模型的免疫状态的免疫学定量检测方法已基本建立。