该项目计划任务要求筛选获得2-3个牛X、Y精子差异表达基因,作为简单、易储运的性别控制DNA疫苗候选基因。从公畜X、Y精子入手,已完成了流式分离高纯度奶牛X、Y精子以及奶牛精子总RNA提取纯化的关键技术研究,并采用了固相支持物磁珠扣除杂交和低丰度mRNA Super SMART技术成功构建Y-X扣除杂交cDNA质粒库,在克隆菌落PCR鉴定后,对27个有插入片段的克隆测序,经牛基因组序列BLAST分析和EST序列分析,发现1个为牛Sry基因片段,3个为牛未知基因片段,经过生物信息学初步分析预测,包括SRY和其他3个未知基因片段均有跨膜和抗原表位结构,可以作为性控DNA疫苗的候选基因开展研究。在中国兽医学报、中国男科学和Animal reproduction science等学术期刊发表8篇论文,申报专利1项。
英文主题词X or Y sperm; DNA vaccine for sex control; subtractive hybridization;flow cytometry