中文摘要：

非凋亡程序性细胞死亡信号传导以及新近发现的Alix/AIP1是国内外的研究热点，其作用机理尚不清楚。本课题在建立兴奋性氨基酸AMPA、KA诱导原代培养神经细胞非凋亡PCD体外模型基础上，进行目的基因Alix 转染实验，检测其在细胞内高表达情况下对非凋亡PCD的作用，以及对MAPK信号传导的影响。并应用细胞水平基因沉默一RNA干扰技术（RNAi），将表达特异性针对Alix靶基因的小片段干扰RNA（siRNA）质粒导入细胞，观察其阻断细胞内Alix表达情况下对非凋亡PCD的作用，以及对MAPK信号传导的影响。从基因和蛋白表达水平证明Alix对非凋亡PCD的促进作用或保护作用，揭示Alix通过MAPK信号传导途径调控非凋亡PCD的分子机理。本课题对于探明非凋亡PCD发生的客观规律，以及对神经退变性疾病、缺血性脑损伤、肿瘤提供治疗新途径等方面均具有重要意义。

结论摘要：

非凋亡程序性细胞死亡信号传导以及新近发现的Alix/AIP1是国内外的研究热点，其作用机理尚不清楚。本课题建立了兴奋性氨基酸KA、AMPA诱导原代神经细胞培养的非凋亡PCD模型；研究证实KA、AMPA诱导的神经细胞死亡具有细胞空泡状、非Caspase依赖、非凋亡之特点，是由基因调控的程序性细胞死亡。在此基础上，检测其ERK1/2、JNK、P38磷酸化表达的变化，再用特异性阻断剂（U0126、SP600125、SB203580）分别阻断ERK1/2、JNK和P38，研究证实，MAPKs信号通路中ERK1/2、JNK参与KA诱导神经元非凋亡PCD过程；未发现P38途径直接参与介导KA诱导的神经元非凋亡PCD。本课题进行的针对靶基因Alix/AIP1的RNAi实验中，证实了在基因干扰以后，Alix/AIP1在mRNA水平和蛋白水平的表达均有下调，并且在Alix/AIP1表达下调的基础上建立KA诱导神经元非凋亡PCD模型，检测到ERK、JNK通路中的磷酸化蛋白（p-p44/42、p-JNK）表达均较未干扰组有所增加，实验证实了Alix/AIP1下调可能对KA诱导的神经元非凋亡PCD有促进作用。