中文摘要：

心脏病已成为人类疾病死亡的第三大原因，严重地威胁着人类的身心健康。研究表明，整合蛋白约占人类基因组编码蛋白的四分之一，其中一些已证明与心脏发育和疾病发生过程密切相关。鉴定新的在心脏发育和疾病中起作用的整合蛋白，对从分子水平阐明心脏发育与疾病发生机理及研发新药靶等都具有重要的意义。本项目拟对申请人克隆的一个新的人类整合蛋白hhole进行深入研究。hhole基因属进化上高度保守的hole亚家族，该亚家族的功能未知。申请人的前期研究结果提示hhole基因在胚胎和成人心脏高度表达，提示与心脏发育和功能有关；初步的信号调控通路分析表明，hhole通过MAPK信号通路发挥其在细胞内的功能性作用。申请人拟应用细胞模型、小鼠模型及酵母双杂交等方法，研究hhole基因在心脏发育和功能维持中的作用，阐明其分子调控机制。

结论摘要：

心脏病严重威胁着人类健康。已知部分整合蛋白与心脏发育和疾病密切相关。鉴定新的在心脏发育和疾病中起作用的整合蛋白，对从分子水平阐明心脏发育与疾病发生机理及研发新药靶等都具有重要的意义。本项目对一个新的人类整合蛋白hhole进行一系列研究。我们克隆了hhole基因960 bp的ORF；Northern结果显示该基因在胚胎和成人的多种组织中表达，且都在心脏中表达最强，提示该基因参与人类心脏的发育和功能维持。亚细胞定位分析揭示hhole蛋白可能定位于细胞的膜状结构。初步的信号途径分析显示，过表达hhole可以强烈地抑制SRE和AP-1介导的MAPK信号途径，表明hhole直接或间接参与了细胞内MAPK信号途径。已利用重组技术在大肠杆菌中成功高效地表达了hhole蛋白，并获得了纯度高达99%以上的纯化GST-hhole融合蛋白。向斑马鱼早期胚胎注射hole基因的外源性dsRNA，导致鱼苗出现围心腔膨大、无围心腔等发育异常的比例明显升高，提示hole基因可能与斑马鱼胚胎的围心腔和心脏发育相关。目前正在用Mopholino oligo方法进一步证实。已发表有该项目标注的论文4篇(SCI论文3篇)。