中文摘要：

周围神经损伤后，其支配的骨骼肌将出现失神经性肌萎缩。由于神经再生速度缓慢，往往在神经再生到达骨骼肌之前，肌肉已经发生不可逆性损伤；因此阻止或延缓失神经肌萎缩成了人们研究的重点。然而无论是药物，还是电刺激等法，效果均不理想，而未能广泛应用于临床。本研究拟在已获得的化学因素诱导骨髓基质干细胞成肌化的基础上，进一步探求生物力学因素对这一过程的影响，采用定量PCR，相差显微镜，电镜等实验方法检测在单纯化学或力学因素下，骨髓间质干细胞的成肌化过程，并对这两类因素所产生的结果进行比较，同时对其叠加效应进行评估。然后将已分化并经证实为骨骼肌细胞的分化后细胞移植入已建立的动物病理模型，定点收集标本，对移植后骨骼肌的再生情况作出评估。此研究的意义:观察应力对骨髓间质干细胞定向分化为骨骼肌细胞过程的影响，探索治疗失神经性肌萎缩的新途径。

结论摘要：

目的观察5-aza与应力调控MSCs向肌细胞分化的作用，以及成肌诱导后对失神经肌萎缩的影响。方法分离纯化大鼠MSCs，并描绘细胞生长曲线，用流式细胞仪鉴定细胞株。以化学诱导，牵拉应力作用于rMSCs，采用免疫荧光、分子生物学方法检测rMSCs的诱导分化效应。成肌诱导后移植于失神经支配腓肠肌动物模型。术后检测大鼠双侧腓肠肌运动单位电位及纤颤电位，HE染色，测定腓肠肌肌纤维横截面积，蛋白总量。结果1. 分离培养的rMSCs，经流式细胞仪测定，与MSCs的表面抗原特性相吻合。2. 5-aza作用P4 rMSCs 24小时后培养两周可检出肌细胞特异标志，牵拉应力作用不能诱导rMSCs向肌细胞分化，但能加速5-aza诱导后向肌细胞分化的进程。3．细胞移植处可见带荧光的细胞核及肌纤维。实验组第4，8周失神经支配腓肠肌湿重残存率、肌纤维横截面积残存率、蛋白总量残存率均明显低于对照组，12周时两组差异无统计学意义。结论 1．5-aza能启动rMSCs向肌细胞的分化，牵拉应力作用不能诱导成肌，但能加速诱导进程。2．MSC移植到失神经骨骼肌内可明显延缓肌萎缩，这一作用只在细胞移植8周以内比较明显。