本研究通过构建鸡脂肪组织和骨骼肌小RNA的cDNA文库的方法,克隆测序后分析从脂肪中筛出22种miRNA,骨骼肌中筛出32种miRNA,发现其中4种是和其他物种同源的miRNA,5种潜在的新miRNA。用TaqMan实时荧光定量PCR技术,对文库中10种miRNA进行鸡12个组织和不同发育时期脂肪与骨骼肌表达量的检测,结果显示,gga-miR-133a和gga-miR-1a在骨骼肌中特异表达,提示它们在骨骼肌的生长发育中起重要作用;gga-miR-122在肝中表达量最高,在脂肪中有少量表达,提示它可能参与鸡脂肪酸代谢和脂肪生长发育。10种miRNA在不同发育时期的脂肪和骨骼肌中表达量也有所变化,说明它们在不同时期作用程度不同。运用miRNA靶基因预测软件对脂肪和骨骼肌中miRNA的靶基因进行预测,在脂肪和骨骼肌的250个表达基因中各预测出184和208个潜在靶基因。对选取的miR-1a、133a、122、126进行功能初步研究,细胞转染实验显示构建成功其表达载体,运用双荧光素酶报告系统对几种预测靶基因ACVR1、CNBP1、BMP5、LPL进行验证,发现CNBP是miR-1a的靶基因。
英文主题词Chicken;Adipose Tissue; Skeletal muscle; MicroRNAs; Target gene