MDV的UL13编码一种蛋白激酶,其功能仍不清晰。本课题分析了UL13基因,发现在151AGSGSYGVV159中152、154、157位的G,159位的V与168AVKK171中的170位K共同参与结合ATP;在264LTHLDIKCGNIFV276序列中,268位D为质子受体,参与质子的转移,同时这段肽参与了与底物的结合,具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶特征,MDV VP22很有可能也是UL13的磷酸化底物。利用杆状病毒表达系统成功表达了MDV UL13蛋白,证明了MDV UL13蛋白激酶对RB-1B病毒空斑大小的形成无明显影响;通过放射性性同位素示踪方法证明表达产物具有磷酸激酶活性,并能催化自身磷酸化,但该激酶不能被Olomoucine抑制,提示UL13可能与病毒致病作用相关。用杂交瘤技术获得了4株能分泌抗UL13蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,并制备出抗MDV UL13全长蛋白的多克隆抗体,结合绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,GFP)与UL13蛋白激酶融合表达,证明了MDV UL13蛋白激酶定位于细胞核内,不影响游离病毒产生。
英文主题词Marek's disease virus; UL13; expression; recombinant virus; biological function