目的观察黄芪总黄酮(total flavonoid of Astragalus,TFA)对高糖下视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells)的作用,初步探讨其对RGCs作用的靶点及凋亡的线粒体机制。方法原代培养RGCs、TFA制备,应用CCK-8、DAPI及Annexin V-PI检测高糖、TFA对RGCs生存的影响,电镜观察细胞线粒体形态。应用免疫荧光、Western检测线粒体凋亡途径关键蛋白。结果原代培养RGCs。CCK-8显示高糖抑制 RGCs 生长,呈时间依赖性,TFA 呈剂量依赖性保护RGCs,TFA为 2.0mg/L 时效果较好。电镜发现高糖组线粒体损伤明显,TFA组抑制了线粒体结构改变。DAPI染色及Annexin V-PI凋亡检测证实高糖诱导RGC凋亡,TFA逆转了此变化。Western blot证实高糖状态下Caspase-3、 胞内cytochrome c和bax升高,线粒体cytochrome c及Bcl-2降低, TFA抑制这种变化。 结论TFA通过线粒体凋亡途径对高糖培养的RGCs有保护作用。
英文主题词retina; ganglion cells; Mitochondria;glucose; Astragalus