中文摘要：

MiRNAs通过在转录后水平负调控靶基因的表达而参与多种生理和病理过程。本项目前期研究表明miR-372通过减慢细胞从S期向G2期过渡导致HeLa细胞生长受到抑制。此外，miR-372在宫颈癌组织中低表达提示miR-372在宫颈癌中可能起到抑癌基因的作用。采用cDNA芯片技术和生物信息学相结合的方法，我们筛选到了miR-372的3个与细胞周期调控相关的候选靶基因。本项目拟通过GFP融合报告载体技术结合实时定量PCR和Western印迹方法来验证miR-372的直接靶基因及其可能的作用方式，同时利用RNA干扰及挽救实验确定靶基因在宫颈癌细胞增殖中的作用，阐明miR-372调节细胞周期进程的分子机制；并通过检测临床组织标本中miR-372和靶基因的表达水平，以及裸鼠肿瘤移植实验确定异常miR-372表达与宫颈癌生长的关系，为宫颈癌的诊断和发现治疗性靶标提供理论基础和实验依据。

结论摘要：

微小RNA通过在转录后水平负调控靶基因的表达而参与多种生理和病理过程。随着研究的深入，越来越多的证据显示miRNA与肿瘤的发生密切相关。宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一，发病率在女性恶性肿瘤中居第二位。在我国每年约有13.5万宫颈癌新发病例，并呈年轻化及上升趋势，死亡率占中国女性癌症的第二位。本项目在期研究中得到（1） miR-372通过减慢细胞从S期向G2期过渡导致HeLa细胞生长受到抑制；（2）miR-372在宫颈癌组织中低表达提示miR-372在宫颈癌中可能起到抑癌基因的作用；（3）采用cDNA芯片技术和生物信息学相结合的方法，筛选到了miR-372的3个与细胞周期调控相关的候选靶基因。在此基础上，本项目通过GFP融合报告载体技术结合实时定量PCR和Western印迹方法来验证了CDK2和CyclinA1为miR-372的直接靶基因，miR-372通过剪切CDK2和CyclinA1的mRNA并抑制其蛋白质合成的作用方式发挥作用，同时利用RNA干扰及挽救实验确定了下调CDK2和CyclinA1在宫颈癌细胞中发挥抑制细胞周期的作用，阐明了miR-372通过负调控CDK2和CyclinA1从而调节细胞周期进程的分子机制；检测了临床组织标本中miR-372表达水平下调而CDK2及CyclinA1的表达水平上调，裸鼠肿瘤移植实验确定了异常miR-372低表达与宫颈癌生长正相关，过表达miR-372可以抑制宫颈癌生长，为宫颈癌的诊断和发现治疗性靶标提供理论基础和实验依据。