中文摘要：

恶性肿瘤是严重影响人类健康的重大疾病，其产生的原因之一是细胞中某些基因的异常表达所致。survivin蛋白是仅在肿瘤细胞中表达的凋亡抑制因子，它的特异性表达抑制了机体免疫系统诱导的肿瘤细胞凋亡，导致肿瘤的形成。本项目应用RNA干扰（RNAi）技术，设计合成被4－9bp间隔的20或21bp凋亡抑制因子survivin编码序列的反向重复序列，与转录载体pTZU6＋1连接构建survivin的短发夹环状

结论摘要：

应用siRNA技术研究Survivin基因抑制肝癌细胞凋亡的作用及其机理，探讨与乙肝病毒X蛋白协同分子（HBXIP）联合抑制肿瘤细胞凋亡的作用。结果显示重组质粒pshRNA-survivin明显抑制Survivin蛋白表达和mRNA转录，抑制率分别为53％-70％和57-64％；针对HBXIP的siRNA载体―pshRNA-HBXIP抑制mRNA转录达62％；单独应用pshRNA-survivin诱导HepG2细胞凋亡；联合pshRNA-HBXIP可增加HepG2的凋亡；pshRNA-survivin单独或联合pshRNA-HBXIP作用HepG2细胞，Caspase-3活性明显增强，Caspase-3和Caspase-9表达增加，NF-κB、IκBα表达则减少。因此认为pshRNA-survivin特异性抑制HepG2细胞Survivin的表达，介导肿瘤细胞凋亡；HBXIP可增加HepG2细胞对Survivin介导凋亡的敏感性；Survivin基因通过抑制Caspase9或Caspase3的活性抑制肿瘤细胞的凋亡，本研究为survivin介导的肿瘤基因沉寂疗法提供了可靠的实验基础。