中文摘要：

慢性乙型肝炎核苷（酸）类似物抗病毒治疗过程中，基因型耐药先于病毒学和生化学突破出现，更有利于早期指示耐药产生。但现有检测方法的性能如灵敏度及特异性等存在局限，制约其临床应用；耐药与突破的关系也有待进一步探究。我们前期研究表明，传统PCR测序检测微量耐药突变的灵敏度较低，而实时荧光PCR、基因芯片及线性探针法易受中国人群特异性HBV 多态性位点影响出现假阳性或不确定结果。我们采用低变性温度共扩增PCR（COLD-PCR）联合焦磷酸测序法建立新型高灵敏度耐药检测方法，同时探寻影响检测特异性的多态性位点并设计新型辅助型探针和引物以提高检测特异性。之后应用HBV 国际标准品和耐药血清盘建立各方法的检测性能参数体系，推动方法学标准化。在此基础上建立判定耐药的相对和绝对定量cut-off值，进一步规范其临床应用，并研究微量突变准种的产生与动态变化规律，为阐明病毒学突破的机制、探寻潜在突变位点提供新思路