中文摘要：

寻找相关细胞在动脉粥样硬化病理变化过程中的关键信号分子,是当前动脉粥样硬化研究的热点。受体相关蛋白(RAP)调控低密度脂蛋白受体相关蛋白LRP1和脂蛋白脂酶LPL,这两个和动脉粥样硬化密切相关的信号蛋白,但RAP对动脉粥样硬化的作用及其机制尚未明确。本课题组前期研究发现,RAP基因敲除可显著降低小鼠动脉粥样硬化的发生,RAP主要调控巨噬细胞LRP1和LPL的表达。本课题拟通过观察RAP对单核-巨噬细胞致动脉粥样硬化关键步骤的影响;通过骨髓移植建立骨髓细胞特异性RAP基因敲除小鼠,在整体动物水平验证单核-巨噬细胞RAP在动脉粥样硬化中的作用;同时检测分析急性冠状动脉综合征患者外周血单核细胞RAP表达变化,验证急性心肌梗死血栓抽吸物中RAP在巨噬细胞中的高表达。研究的实施有望确定单核-巨噬细胞RAP作为动脉粥样硬化新的生物标记物和干预新靶点的可能性。

结论摘要：

项目以观察单核-巨噬细胞RAP基因作为调控动脉粥样硬化的分子标记物为研究重点。我们发现RAP基因全身敲除不影响小鼠的体重变化和AngII引起的小鼠尾动脉血压升高，但可显著增高血浆胆固醇浓度（RAP+/+1122±40mg/dl；RAP-/-1500±56mg/dl，P<0.001），与此同时，显著降低主动脉弓动脉粥样硬化病变面积（RAP+/+18.28±2.24%；RAP-/-11.74±0.99%，P<0.05）。通过骨髓移植技术，我们成功建立了骨髓细胞特异性RAP基因敲除小鼠，骨髓细胞特异性RAP基因缺失对小鼠的体重和血浆胆固醇没有显著影响，也不降低小鼠主动脉弓动脉粥样硬化面积百分比 (RAP +/+: 24.07 ± 2.14%; RAP -/-: 19.24 ± 2.21%; P=0.124)。Real-Time PCR检测急性冠脉综合征患者和对照组外周血单核细胞RAP、LRP1和LPL的mRNA表达，并没有发现两组有显著差异；采用Western blotting检测，我们发现，胆固醇负荷（AcLDL；100gμg/ml）和AngII（1μM）并不改变小鼠腹腔巨噬细胞RAP和LRP1的表达。上述结果提示单核-巨噬细胞RAP基因并不是动脉粥样硬化调控的关键分子。高脂喂养的LDLR-/-小鼠，皮下予以500ng/kg/min的AngII持续输注4周，也是腹主动脉瘤（AAA）研究的小鼠模型。本项目亦观察了RAP基因对AAA的影响。测量肾动脉以上腹主动脉最大直径，RAP+/+和RAP-/-小鼠无统计学差异，AAA发生率分别为53%( RAP+/+)和40％（RAP-/-），两者无统计学差异（p = 0.5）。