中文摘要：

棉花黄萎病是我国以及世界棉花作物的主要病害之一，难以防治。动物病毒的OTU 蛋白酶具有抑制寄主抗病毒活性、抑制寄主免疫反应通路，增强病毒侵染性的功能。本项目拟采用Gateway克隆技术和农杆菌介导法构建新病毒Verticillium chrysogenum virus (VcV)基因组的侵染性cDNA克隆，研究VcV缺失OTU 蛋白酶基因对VcV的病毒粒子形成、VcV的复制、VcV的毒力及寄主范围的影响；并通过转OTU 基因于强毒黄萎菌株中，研究转OTU基因菌株对棉苗的致病力，对化学药剂、生防细菌的敏感性和温度适宜性的变化。从而获得VcV基因组的侵染性cDNA克隆；探明在VcV-黄萎菌-棉花互作过程中，OTU基因增强VcV对黄萎菌的侵染能力，使黄萎菌的致病力和抗胁迫能力减弱的功能。项目研究将为VcV应用于防治棉花黄萎菌提供依据，为利用VcV的OTU基因控制其它植物病原真菌提供基础性依据。

结论摘要：

已有研究表明，动物病毒的OTU基因增强病毒的侵染性、降低寄主免疫力，植物病毒的OTU基因增强病毒的侵染性。但真菌病毒的OTU基因是否增强病毒的侵染性、降低寄主免疫力至今未见研究报道。本项目开展了真菌病毒VdCV1(Verticillium dahliae chrysovirus 1)的OTU 基因对病毒复制的影响研究；转OTU 基因黄萎菌菌株及其抗胁迫能力研究；VdCV1的4个基因的沉默抑制功能研究；水稻小核菌携带病毒的研究。结果表明，真菌病毒VdCV1的OTU 基因显著增强植物病毒FoMV(Foxtail mosaic virus )的RdRp的RNA积累；降低病毒侵染后病程相关蛋白基因PR1a的表达量；增强植物病毒FoMV、CMV（cucumber mosaic virus ）的复制。转基因黄萎菌研究表明，分别获得了转OTU基因、转GFP基因黄萎菌株，采用MPG1基因驱动GFP基因在黄萎菌中表达，荧光显微镜下检测发出绿色荧光。转OTU基因黄萎菌株对低温胁迫（17℃）较野生黄萎菌株（T-9）敏感。沉默抑制研究表明，VdCV1的4个基因中复制酶（RdRp）基因是一个沉默抑制子。上述结果阐明了真菌病毒VdCV1的OTU 基因对病毒、黄萎菌、植物的影响，以及VdCV1的RdRp的沉默抑制功能。水稻小核菌携带病毒的研究表明，一株水稻小核菌株中携带有4种病毒，该结果丰富发展了真菌病毒的研究。