中文摘要：

环氧氯丙烷（EC）是我们筛选的生物瓣膜和组织工程瓣膜防钙化剂，防钙化效果非常显著，处理的组织工程瓣膜去细胞支架上体外骨髓干细胞培养诱导分化的种子细胞生长良好，但其防钙化机制尚未完全明确。本课题在原有研究的基础上，拟采用傅立叶转换红外光谱测定、圆二色性分析、NMR等现代物理方法以及细胞培养、免疫组化、RT-PCR、Western Blot等生物学技术深入研究①EC对胶原蛋白、弹性蛋白的交联模式以及对蛋白质空间结构影响；②EC处理对瓣膜组织细胞外基质降解代谢的影响及其与组织钙化的关系；③EC处理对细胞外基质-细胞相互作用的影响以及骨髓干细胞体外培养诱导分化的种子细胞在EC处理后去细胞瓣支架上生长的生物学特征等方面进行研究，进一步探明环氧氯丙烷处理方法防止生物瓣膜和组织工程瓣膜钙化的机制，为进一步筛选生物瓣膜和组织工程瓣膜防钙化处理方法打下理论基础，具有重大的理论价值和实用价值。

结论摘要：

环氧氯丙烷是我们首先筛选出的具有防止生物瓣和组织工程瓣钙化作用的交联剂，但防钙化的机制不明。在课题的资助下，本研究从EC处理后瓣膜组织中胶原蛋白侧链基团及蛋白质空间结构的变化、对细胞外基质降解代谢的影响、细胞外基质－细胞相互作用的影响等方面研究EC处理防钙化作用机理。证明EC能够通过环氧基和氯基两个官能团和瓣膜组织中胶原蛋白的游离羧基和氨基发生亲核取代反应和Schiff's base反应，这种反应是EC和瓣膜组织中蛋白质发生交联反应的基础。通过这一反应，EC能够减少瓣膜组织中游离的羧基，是EC处理生物瓣膜具有优良的防钙化效果的重要原因。并且EC处理能够增加新鲜瓣膜以及GA处理后瓣膜组织的机械性能和组织稳定性，提高瓣膜组织的抗酶消化能力，改善表面性状，延缓细胞外基质中MMPs的降解代谢。从多个角度研究了EC处理生物瓣膜防钙化的机制。另外制备了EC处理的猪主动脉瓣去细胞支架，发现EC处理的猪主动脉瓣去细胞支架是一种较为理想的组织工程瓣膜支架材料，并在EC处理后去细胞支架上种植了人骨髓间充质干细胞(MSCs)，为进一步构建防钙化的组织工程心脏瓣膜打下了基础。