本研究挑选具有细胞周期依赖性染色的自身免疫病人抗体进行Hela细胞cDNA文库筛选,鉴定出一个与经典细胞核有丝分裂器蛋白NuMA定位相似的细胞核微管结合蛋白CDCA4(cell division cycle associated 4)。在此基础上,课题组将研究重心分为两个方向。一方面同时也是重点是通过制备抗体,确认了CDCA4间期在细胞核内有富集、分裂期定位于纺锤极上的周期特异性分布;RNAi、过表达等试验结果表明该蛋白为一个抑制细胞生长的调控因子,在细胞分裂期发挥着重要的调节作用;同时通过pull down及Co-IP试验,寻找并鉴定了一个新的CDCA4相互作用蛋白。在此同时,继续研究NuMA在细胞分裂调控方面的作用。通过GST Pull Down Assay 寻找出一系列NuMA相互作用候选蛋白,并确定了NuMA的isoform。
英文主题词NuMA; CDCA4;RNAi;Pull down assay;Isoform