在本研究当中,我们设计了一种新型的能够靶向表达卵泡刺激素受体的细胞的siRNA运载体,其核心思想是构建卵泡刺激素(FSH)β链多肽与鱼精蛋白的融合蛋白(FSHβ/protamine1),利用鱼精蛋白富含正电荷的特性,与带负电荷的siRNA非共价结合,通过FSHβ多肽链与FSH受体的特异结合,将目的siRNA主动靶向导入表达FSH受体的靶细胞(颗粒细胞)。因此,我们首先构建了卵泡刺激素(FSH)β链多肽与鱼精蛋白的融合蛋白的真核表达载体。利用脂质体转染后,经过G418的筛选获得稳定表达FSHβ/protamine1融合蛋白的CHO细胞株。研究显示分泌型表达的FSHβ/protamine1融合蛋白经过纯化后能够携带siRNA进入表达FSH受体的颗粒细胞,并部分沉默靶基因ASMase的表达。研究成果为在体卵巢功能的保护探索出一条新的思路。
英文主题词Follicle-Stimulating Hormone;Protamine 1; Fusion Protein;siRNA;SMPD1