本项目首先应用cDNA基因芯片及实时荧光定量RT-PCR方法分析子痫前期胎盘组织差异基因表达情况,同时应用显微切割技术收集胎盘滋养细胞,二维高效液相色谱和离子回旋串联质谱分析系统的方法研究胎盘差异蛋白的定量;在此基础上对所发现的关键分子14-3-3 蛋白在胎盘滋养细胞中的定位入手,通过RNA干扰和表达质粒转染的方法下调或上调滋养细胞内14-3-3蛋白的表达,研究其对滋养细胞增殖、分化能力的影响,首次发现并分析了其在滋养细胞外所起的作用。运用蛋白质组学和生物信息学的方法从整体角度分析14-3-3蛋白在滋养细胞所起的作用,分析14-3-3 蛋白与滋养细胞内其他蛋白的相互作用。通过本课题我们认为14-3-3 蛋白在滋养细胞的增殖、侵袭和合体化等生物学行为中起重要作用的重要调控作用,是调节滋养细胞分化方向的关键节点分子之一,也许对将来治疗性的改变14-3-3蛋白与相关蛋白作用改善妊娠结局提供思路,为子痫前期-子痫疾病发病中的分子机制提供了新的依据。
英文主题词14-3-3;Pre-eclampsia;Proteomics;Trophoblastic Cells