高油酸菜油有很好的营养保健功能,因而高油酸油菜育种研究是目前油菜育种研究的一个重点,但其脂肪酸合成分子机理尚未完全搞清,且相关的研究也多集中于基因方面,尚无蛋白方面研究的报道。本研究以油菜近等基因系材料脂肪酸形成期种子为研究对象进行研究,主要研究内容包括(1)采用TCA-丙酮沉淀法提取蛋白质,ProteoMiner低丰度蛋白富集系统预处理蛋白,利用双向电泳的方法展现差异蛋白点;(2)对差异显著的蛋白点进行质谱或测序分析,并利用相关软件进行分析,进而采用Western-blot或RT-PCR方法验证,筛选出对脂肪酸合成起影响作用的关键功能蛋白及其对应基因;(3)克隆2-3个关键功能蛋白对应基因,并在拟南芥中做基因功能验证。预期通过本研究筛选出影响高油酸油菜脂肪酸合成的关键功能蛋白及其对应基因,促进高油酸油菜脂肪酸合成分子机理的研究,加快高油酸油菜的育种进程。
英文主题词high oleic acid rapeseed;near-isogenic lines;gene cloning;differential exprssed protein;Real-time quantitative PCR