ENU诱变及大规模(约3000基因组)斑马鱼造血发育缺陷突变体的正向遗传筛选得到66种突变体,根据表型分为5种亚型1,永久造血红系缺陷(3种);2,永久造血多谱系缺陷(25种);3,原始造血巨噬系缺陷(10种);4,原始造血粒细胞缺陷(26种);5,原始造血巨噬-粒系缺陷(2种)。首先利用其中2个定向造血突变体rumba与samba,发现了维持造血干细胞必不可少的新基因(Du et al. Development, 2011)。接着利用1个Pu.1突变体,证实了Pu.1与Runx1、cMyb协同控制巨噬细胞和中性粒细胞的命运与成熟(Jin et al. Immunity, under review)。此后,构建了1个转基因斑马鱼品系Tg(coronin1a:eGFP),分析了在活体斑马鱼的损伤诱导炎症反应中巨噬细胞与中性粒细胞的体内行为及其在组织再生中的作用。最后,鉴定了172突变体是cloch突变体的一个新型弱等位基因,为研究早期造血和血管内皮细胞的发育提供了模型。后续我们将详细地分类研究余下的各种突变体,有望为脊椎动物血细胞生成的基因调控网络提供全新见解。
英文主题词zebrafish;hematopoietic stem cells;point mutation;genetic screening and identification