中文摘要：

脂肪酸合成酶FASN的异常高表达参与前列腺癌的发生；目前对导致其高表达的机制研究主要集中于正向调控，但事实上其负向调控的减弱发挥着更为重要的作用。我们前期从转录后调控入手，发现RNA结合蛋白QKI与FASN结合并抑制其表达；此外，在前列腺癌样本中QKI表达降低。结合文献我们推测，在前列腺癌中QKI发挥抑癌功能，其通过自身表达降低减弱对FASN的抑制，高表达的FASN导致脂代谢紊乱，从而促进前列腺癌的发生。本项目拟进一步系统分析前列腺癌发生发展过程中QKI的变化规律及其在肿瘤中降低的原因；采用基因沉默和过表达方法干预QKI的表达，通过体外的细胞生物学实验和体内裸鼠荷瘤、小动物成像等技术，明确QKI对FASN的负向调控在前列腺癌发生发展中的作用；在此基础上，采用3'UTR报告系统、RNA稳定性和IP-质谱联用等方法阐明QKI负向调控FAS的具体机制。最终为临床治疗和药物设计提供更直接的策略。

结论摘要：

我们的研究是首次在前列腺癌中报道RNA结合蛋白QKI的表达情况，同时首次报道了QKI在前列腺癌发生发展中所起到的作用。通过免疫组化、western blot和qPCR方法在病理组织标本中筛查QKI表达水平以及表达趋势。通过对前列腺癌细胞系的筛选，选取过表达慢病毒以及基因沉默慢病毒分别对QKI的表达水平进行调整，再与对照组进行细胞生物学功能上的比对，以此阐述QKI在前列腺癌的发生发展过程中所起到的作用及其机制。本项目拟运用免疫组化检测前列腺癌样本中QKI的表达水平和甲基化特异的PCR检测QKI启动子甲基化的程度，系统分析前列腺癌发生发展过程中QKI的变化规律并明确机制；采用基因沉默和过表达手段改变QKI和/或FASN的表达，通过细胞增殖实验、Transwell实验以及裸鼠荷瘤和小动物体内成像等技术分析QKI对FASN的负向调控对细胞生物学行为的影响，以及在前列腺癌发生发展中的作用；在此基础上，采用3’UTR报告系统、RNA稳定性和质谱分析等方法进一步阐明QKI对FASN负向调控的具体分子机制。通过该课题的研究希望能够从新的角度阐明前列腺癌中FASN高表达的分子机制；深入认识这一调控机制的异常在前列腺癌发生发展过程中的作用；有望对前列腺癌的临床治疗提供新的策略和药物靶点。