中文摘要：

卵巢癌不易早期发现，经过手术、化疗等综合治疗，预后仍很差。近年免疫治疗发展迅速。CD137L是新发现的肿瘤坏死因子超家族的成员，与表达于激活T细胞表面的CD137相互作用，为T细胞的活化和生长提供共刺激信号，许多研究证实了鼠CD137在抗肿瘤免疫中的重要作用及良好的应用前景，但关于人CD137/CD137L的研究很少。基因治疗的靶向性是基因治疗安全性的保障，人端粒酶逆转录酶（hTERT）是端粒酶的限速酶，体外实验表明hTERT启动子在正常细胞中无表达活性，而在永生化和肿瘤细胞中则有显著活性。将目的基因构建于hTERT启动子下可使基因仅表达于端粒酶阳性细胞中。本课题拟构建hTERT启动子调控下CD137L表达载体，将其转染入卵巢癌细胞系和正常细胞中，观察基因表达的靶向性，体外观察CD137L阳性癌细胞诱导的CTL的杀瘤活性，并进行动物实验，观察其抑瘤作用，为卵巢癌的免疫基因治疗提供实验依据。

结论摘要：

CD137L是新发现的肿瘤坏死因子超家族的成员，与T细胞表面的CD137相互作用，为T细胞的活化和生长提供共刺激信号。人端粒酶逆转录酶（hTERT）启动子在正常细胞中无表达活性，而在肿瘤细胞中则有显著活性。本课题旨在将CD137L基因构建于hTERT启动子下以实现基因的靶向表达，并观察转染CD137L后诱导的抗肿瘤免疫，并探讨了与IL-21的联合抗肿瘤作用。结果显示，hTERT启动子调控下CD137L表达载体构建成功，可在卵巢癌细胞中表达，而在正常上皮细胞中无表达。体外将转染后的卵巢癌细胞经丝裂霉素C处理后在IL-2和抗CD3单抗的存在下与PBMC共孵育，诱导产生CTL，对卵巢癌显示出较高的特异性杀伤活性。建立卵巢癌裸鼠模型，将诱导的CTL输注到其体内后，可抑制肿瘤的生长。CD137L质粒和IL-21质粒共转染卵巢癌后，较单独应用一种质粒诱导的抗肿瘤免疫更强，其机制可能是同时加强了特异性免疫和非特异性免疫。结果表明CD137L可能成为卵巢癌免疫基因治疗的靶基因，联合IL-21效果更佳，其确切机制有待进一步研究。