中文摘要：

RNA干扰(RNA interfeerence,RNAi)是近年来被揭示的一种转录后基因沉默效应，由于其特异强，效应可传导放大，不影响DNA结构，可通过适当载体转入人类细胞，有可能成为人类疾病基因治疗的新策略。本研究拟检测人涎腺粘液表皮样癌Mc3和腺样囊性癌SACC83细胞中H-ras,C-myc,C-erbB2,C-fos,bcl-2癌基因DNA,mRNA及相应蛋白表达水平。从中筛选2个表达水平最高的癌基因,从Gene Bank获取基因序列，制备相应基因的含21个核苷酸的双链RNA（small intefering RNA,siRNA），构建表达siRNA的质粒载体，并转染到上述细胞中，检测转染细胞相应癌基因、基因产物表达以及生物学特性的改变，探讨RNAi抑制涎腺癌增殖和转移的可能性，为建立肿瘤基因治疗的新方法提供线索。

结论摘要：

用基因芯片BioStarH-I筛选配对细胞差异表达基因，用RT-PCR、免疫组化、Western blot验证与增殖转移相关的高表达基因，设计靶基因shRNA，构建pWH1表达载体，转染靶细胞，G418筛选稳定转染细胞克隆，体外和裸鼠体内试验检测细胞增殖、转移相关生物学特性。发现，MMP-1mRNA基因在腺样囊性癌ACC-M细胞中高表达，用RNAi沉默MMP-1，可抑制ACC-M细胞克隆形成率（35.3%）、迁移力（33.3%）、侵袭力（44.8%）和转移率（78.52%），对细胞增殖作用不明显。TGF-?1基因在粘液表皮样癌Ms细胞中高表达，用RNAi沉默TGF-?1，可抑制Ms细胞克隆形成率（54.5%）、黏附力（21.9%）、迁移力（35.5%）、侵袭力（38.7%）、体内增殖率（59.0%）和转移率（62.0%）。CXCR4基因在粘液表皮样癌Mc3细胞中高表达；用RNAi沉默CXCR4，可抑制Mc3细胞克隆形成率（33.9%）、侵袭力（47.4%）、趋化性（54.2%）体内增值率（17.8%）和转移率（67.78%）。结论运用RNAi技术可在一定程度上抑制涎腺癌细胞增殖转移。