本课题在前期工作基础上利用昆虫细胞蛋白表达系统制备了乳凝集素。在体外和动物实验中证实,给予外源性乳凝集素对脐血来源树突状细胞分化成熟及肠相关淋巴组织树突状细胞向活化形式转化有促进作用,并对树突状细胞外泌小体分泌有促进作用;同时还可促进 CD4+ T 淋巴细胞向免疫调节细胞分化。用乳凝集素免疫动物成功制备抗体后,检测了内源性乳凝集素在肠相关淋巴组织细胞及肠上皮细胞中的分布,得到其促进淋巴细胞分化的直接证据;并发现它在肠上皮细胞迁移过程中的表达分布变化及与tubulin的作用关系,提示其抗轮状病毒的作用与肠粘膜损伤后的上皮修复有关。此外内源性乳凝集素在新生幼鼠肠道未见表达提示乳凝集素在肠道发育、成熟中占有重要地位。临床研究显示母乳喂养组较人工喂养组轮状病毒性腹泻发病年龄晚、病程短、脱水及电解质紊乱程度轻;母乳喂养组患儿血及粪便中的IFN-r水平显著高于混合喂养和人工喂养组。研究初步证实了外源性乳凝集素调节肠相关淋巴组织免疫功能可能机制,同时进一步验证了其促进肠上皮细胞成熟假设,为更深入探讨其作用机制开辟了新的思路。乳凝集素表达优化和抗体成功制备为将来的临床开发和利用提供了切实可行的方法。
英文主题词Lactadherin;DC;Enterocyte;Rotavirus;Cytokines