新生隐球菌是一种重要的病原真菌,常常引起致命的脑膜炎。后者治疗时间长,复发率较高。目前在隐球菌脑膜炎治疗中困扰临床医生的一个最重要问题,就是由于无法在治疗中对隐球菌的活力做出有效的准确判断,从而对疗程的判定缺乏客观的时间标准。检测rRNA和rRNA基因判断微生物活力,尤其是对于判断微生物在"活而不可培养"状态下的活力有很强的特异性和敏感性。本项目通过检测治疗后不同时间段隐球菌rRNA和rRNA基因的特异性片段,探寻判定隐球菌活力的特异性rRNA,与真菌培养和涂片结果、动物接种结果以及电镜超微结构观察结果相结合,建立隐球菌活力判定的综合判断标准,为隐球菌脑膜炎治疗的治疗效果和疗程判定奠定基础,提高隐球菌感染治疗的有效率。
Cryptococcus neoformans;cryptococcal meningitis;viability;rRNA;RT-PCR
新生隐球菌是一种重要的病原真菌,常常引起致命的脑膜炎。后者治疗时间长,复发率较高。目前在隐球菌脑膜炎治疗中困扰临床医生的一个最重要问题,就是由于无法在治疗中对隐球菌的活力做出及时、有效的准确判断,从而对疗程的判定缺乏客观的时间标准。检测rRNA和rRNA基因判断微生物活力,尤其是对于判断微生物在"活而不可培养"状态下的活力有很强的特异性和敏感性。本项目通过RT-PCR检测活菌和死菌四个小亚基的表达量,筛选出关键亚基18s和5.8s,随后又对体外培养不同时间段经抗真菌药物干预的隐球菌菌体的关键亚基进行RT-PCR检测并与动物实验结果、电镜超微结构观察结果相结合,初步建立了隐球菌活力判定的综合判断标准,为隐球菌脑膜炎的临床疗效观察和疗程制定奠定了基础,进而提高隐球菌感染治疗的效率。