调节性细胞容积减小(RVD)是心肌细胞的重要生理功能。RVD功能异常与心肌细胞的缺血再灌注损伤、细胞凋亡与坏死及心律失常的发生密切相关。但心肌细胞RVD过程的离子通道机制目前尚不清楚。为阐明参与心肌细胞RVD过程的容积敏感性钾离子通道的特性和分子定位,本研究拟采用膜片钳全细胞和单通道记录,观察心肌细胞容积敏感性钾离子通道的电生理学和药理学特性及单通道活动的动力学特征,判断其所属的钾通道亚型;用RT-PCR方法确认该亚型钾通道基因在心肌细胞的表达,为电生理学实验结果提供依据;克隆该容积敏感性钾通道的基因cDNA,并稳定转染NIH/3T3细胞,观察所表达通道的容积敏感性和电生理学、药理学特性,并与心肌细胞固有容积敏感钾通道特性比较,以进一步确认其分子定位。本研究将为阐明心肌细胞RVD过程的离子通道机制、进一步研究其细胞内信号转导过程和探讨其病理生理学意义提供重要的实验依据。
英文主题词Cardiac Myocytes; Regulatory Volume Decrease; Volume Sensitive K channel; Patch Clamp