保加利亚乳杆菌做为直投发酵剂的重要菌株,冻干过程中受冷冻、干燥和渗透压等多重胁迫作用,致使代谢能力下降,活性和活力损失,造成巨大的经济损失,因此阐明其抗冻干胁迫机理,为解决制约乳酸菌冻干生产的技术瓶颈提供重要的理论基础。本项目基于保加利亚乳杆菌经氯化钠(盐)刺激后可明显提高抗冻干性能的结果,利用高效液相、反转录定量PCR、基因芯片和双向荧光差异凝胶电泳等技术,通过构建盐刺激后乳杆菌糖代谢主要产物的代谢通量模型,明确关键代谢产物流量分配与菌株冻干存活率的相关性;同时研究盐刺激下糖代谢路径改变和代谢关键酶的活性及相关基因转录水平变化,识别出具有抗冻干能力乳杆菌关键biomarkers(酶和mRNA),并利用生物信息学工具和相应数据库,分析biomarkers作用机制,共同揭示出菌株抗冻干胁迫机理。项目从糖代谢关键酶分子水平层次阐明乳杆菌抗冻干胁迫机理,为获得强抗冻干胁迫的乳杆菌株提供技术支持。
英文主题词Lactobacillus bulgaricus ATCC 11842;NaCl stress;Metabolic pathways of pyruvate;Energy metabolism;Proteomics