中文摘要：

由于结构和活性之间的密切关系和低聚糖的功能性，人们越来越期望得到设想结构和链长的功能性低聚糖。本项目旨在利用内切甲壳素酶的水解和转糖基双重作用合成功能性低聚糖，拟在E.coli BL21 DE3中大量表达内切甲壳素酶LlChi18A和甲壳素结合蛋白LlCBP33A，并进行分离纯化及酶学性质研究；通过均相N-酰化反应制备不同乙酰度的N-乙酰化壳聚糖，研究其分子结构参数对甲壳素酶水解N-乙酰化壳聚糖的影响，揭示其催化水解机制及甲壳素结合蛋白的协同作用；再利用甲壳素酶的糖基转移作用，以不同聚合度的水解产物、半乳糖/乳糖等为底物合成功能性低聚糖，采用高效液相色谱-质谱联用和核磁共振碳谱分析产物结构，弄清糖基转移反应的规律；测试并比较甲壳类低聚糖对猪致肠病大肠杆菌的抗粘连性能；为水解N-乙酰化壳聚糖甚至甲壳类天然多糖生物合成功能性低聚糖提供科学理论依据。