中文摘要：

胃癌是我国主要恶性肿瘤之一,死亡率高居首位。转移扩散是其预后不良的主要原因，当前的抗转移治疗尚不能获得满意效果。肝素酶基因是1999年被克隆鉴定的新基因，可能与肿瘤的演进转移相关。我们的前期研究发现，胃癌细胞中肝素酶基因表达上调是其高侵袭转移潜能的重要分子标志。RNA干扰是最近发展起来的一项革命性技术，能够高效、特异地使目的基因沉默，获得功能丧失，siRNA被Science杂志评为2002年度最耀眼的明星分子。本项目在发现肝素酶基因表达上调与胃癌淋巴结、腹膜转移相关的基础上进行干预治疗研究，拟筛选出靶向作用于肝素酶基因的高效siRNA分子，特异性地抑制胃癌细胞中该基因的表达，通过肿瘤细胞体外侵袭实验和动物实验观察、评价siRNA分子对癌细胞侵袭转移的抑制，找到从分子水平阻断胃癌转移的新策略，提供肝素酶基因参与胃癌转移发生、发展过程，并可能发挥关键作用的直接证据。

结论摘要：

我们考察了肝素酶在胃癌侵袭及转移过程中的作用，并通过体外实验及动物实验进行了验证和干预治疗。首先，我们研究了临床胃癌患者淋巴结转移灶与腹腔冲洗液脱落肿瘤细胞的肝素酶表达水平，结果表明在转移灶及腹腔脱落的胃癌细胞中，肝素酶的阳性率较原发灶有显著升高。我们进一步应用RNA干涉技术，沉默了胃癌细胞系SGC7901肝素酶的表达，经体外侵袭实验观察胃癌细胞系侵袭能力的变化。结果表明，沉默肝素酶基因表达显著地降低了胃癌细胞的侵袭能力，提示肝素酶在胃癌转移过程中发挥重要作用。我们联合应用靶向肝素酶基因的siRNA分子与化疗药物对抗胃癌腹膜转移，效果较单独使用化疗药显著。在此基础上，我们构建了稳定表达肝素酶靶向siRNA的质粒载体及阴性对照载体，转染SGC7901细胞系，筛选后得到肝素酶稳定沉默的胃癌细胞株，进行裸鼠腹腔注射观察肝素酶沉默后的胃癌细胞系在动物腹腔内侵袭成瘤能力的变化。结果发现，肝素酶稳定沉默的SGC7901细胞在裸鼠腹腔成瘤能力显著下降。这为今后肿瘤转移阻断治疗提供新的候选靶点，为进一步制订胃癌合理高效的综合治疗方案，精确高效地阻断胃癌转移提供了新的线索。