中文摘要：

重型再生障碍性贫血（SAA）是免疫介导的骨髓衰竭症。我们曾对SAA进行了系统的发病机制研究，发现SAA骨髓衰竭与效应T细胞(Te)"瀑布激活"有关，但Te损伤骨髓靶细胞的机制及其与临床疗效的关系还不清楚。本课题通过流式细胞术（FCM）检测SAA患者和正常人骨髓CD3+CD8+CD25+、CD3+CD8+HLA-DR+ Te亚型数量及比例；FCM检测SAA患者Te胞浆 TNF、穿孔素、颗粒酶B蛋白表达及细胞表面FasL表达；FCM检测骨髓不同阶段、系别造血细胞表面Fas表达，明确Te损伤靶细胞的方式。通过分选获得两群Te，分别与不同阶段、系别造血细胞混合、交叉培养，以TUNEL法和激光扫描共聚焦显微镜观察靶细胞凋亡，明确SAA患者Te的靶细胞及其在患者间的个体差异。通过以上研究明确SAA Te与骨髓损伤的因果关系，验证 Te导致骨髓衰竭的详细机制，为临床制定个体化免疫抑制方案提供依据。

结论摘要：

国内外目前对于效应T细胞的研究集中于HIV感染患者及多发性硬化等，尚缺乏对于SAA免疫发病中效应T细胞的研究，本项目已按计划书要求完成，并取得预期成果。 1．CD8+HLADR+细胞的数量及功能因子穿孔素、颗粒酶、TNF-β、FasL均较正常人明显增高，进一步对CD8+HLADR+细胞对骨髓造血细胞损伤进行验证，发现SAA患者CD8+HLADR+细胞能够导致骨髓造血细胞凋亡增加，而SAA患者CD8+CD25+效应T细胞的数量无明显变化。CD8+HLADR+细胞可能是SAA免疫损伤骨髓造血细胞的主要效应T细胞，穿孔素、颗粒酶、TNF-β、Fas途径则可能是该群细胞损伤骨髓造血的主要方式，强化序贯免疫抑制治疗能够有效控制该群细胞数量及功能。而CD8+CD25+效应T细胞在SAA发病机制中不起主要作用，故CD25单抗并不适于SAA治疗，反而有可能损伤有益于免疫功能恢复的CD4+CD25+调节T细胞。 2. SAA患者CD8+HLADR+效应T细胞能够导致正常CD34+、CD33+、CD14+细胞凋亡增高，而对CD45-细胞作用较弱，提示SAA患者CD8+HLADR+效应T细胞对骨髓干祖细胞、粒系、单核系细胞均具有杀伤作用。 3. 细胞因子TNF-β能够明显增加CD8+HLADR+细胞体外对骨髓的杀伤能力；IL-2能够增加CD8+HLADR+细胞体外的增殖能力，同时这种刺激作用能够被CSA及IL-2受体拮抗剂阻断。 综上所述，我们在国际上率先深入揭示了CD8+HLADR+细胞在SAA发病中的关键作用，研究结果处于国际领先水平，为SAA诊断、治疗提供新指标、新靶点，也为其他自身免疫性疾病研究提供新的思路。