提高放疗靶细胞的敏感性、减少正常细胞的辐射损伤是肿瘤放疗的研究重点,而寻找有效的辐射损伤修复蛋白是放射生物学的研究热点。我们在以往的研究中通过双向电泳发现受到全身照射的小鼠,其小肠上皮细胞ERp29蛋白显著增加;而以IEC-6细胞为模型也发现相同结果。结合该蛋白的已知功能推测它可能是一个辐射损伤修复蛋白。本项目拟采用分子杂交技术,体内外检测小肠上皮细胞受到电离辐射后ERp29基因表达随时间和剂量
提高放疗靶细胞的敏感性、减少正常细胞的辐射损伤是肿瘤放疗的研究重点,而寻找有效的辐射损伤修复蛋白是放射生物学的研究热点。我们在以往的研究中通过双向电泳发现受到全身照射的小鼠,其小肠上皮细胞ERp29 蛋白显著增加;而以IEC-6 细胞为模型也发现相同结果。结合该蛋白的已知功能推测它可能是一个辐射损伤修复蛋白。本项目首先在蛋白质和mRNA水平检测小肠上皮细胞受到电离辐射后ERp29 基因表达随时间和剂量的变化模式,证实了该基因对辐射的反应性。在此基础上克隆该基因的编码区,将其克隆到真核表达载体pDNA3获得了正反义表达载体,导入IEC-6细胞。经过免疫印迹检测,得到了ERp29基因不同表达水平的细胞株,并检测了它们对辐射损伤修复能力的改变,结果显示ERp29基因表达受到抑制后,ICE-6细胞的辐射损伤程度加强。为了进一步探索ERp29表达受到辐射诱导的分子机制,我们探讨了辐射诱导的内质网应激在调控ERp29表达上调中的作用,结果显示IRE1信号通路与之相关联。本项目创新性地研究ERp29 基因在电离辐射中的作用,使人们对其功能有更深入的认识,从而为拓展放疗的应用提供实验基础。