中文摘要：

在先前的研究中，我们通过将人源幽门螺杆菌（Hp）在蒙古沙鼠体内连续感染传代，建立起稳定的感染模型，同时获得一株高感染力的适应性菌株(CS98-20)，经用双向电泳和质谱技术对该菌株在适应性定植前后的蛋白组进行比较研究，初步筛选鉴定出三个与Hp适应性定植可能相关的蛋白及其基因。本研究拟利用原核表达系统对其中功能未定基因HP0318进行克隆、表达和纯化，通过质谱技术对表达的蛋白质分子进行序列解析，进而了解该蛋白质分子的一级结构和可能的二级结构。同时，拟采用基因打靶技术构建CS98-20株的HP0318基因突变株，通过沙鼠定植实验观察该基因对Hp感染力的影响，为明确HP0318基因的功能提供实验依据，并为进一步深入研究HP0318基因及蛋白打下基础，以期能为丰富对Hp的适应性生理学变化和定植机制的认识提供理论依据。

结论摘要：

在先前的研究中，我们通过将人源幽门螺杆菌（Hp）在蒙古沙鼠体内连续感染传代，建立起稳定的感染模型，同时获得一株高感染力的适应性菌株，经对该菌株在适应性定植前后的蛋白质组进行比较研究，筛选鉴定出功能未定基因HP0318可能与Hp适应性定植相关。本课题拟构建HP0318基因突变株，通过沙鼠定植实验探明其在HP定植过程中的作用，同时重组表达HP0318蛋白，并对其进行序列解析，进而了解该蛋白质分子的一级结构和可能的二级结构，为明确HP0318基因的功能提供实验依据。结果本研究采用同源重组技术构建了一株Hp的HP0318基因缺失突变菌株，通过测序和PCR对突变株进行了鉴定。经突变菌株与未突变的沙鼠适应株的沙鼠定植试验，表明突变株在沙鼠胃内的定植率和定植密度显著低于非突变株，证实HP0318在幽门螺杆菌的适应性定植过程中发挥了重要的作用；采用基因工程技术体外克隆表达了HP0318，经软件结构预测，此蛋白存在FMN结合域；通过结合血红素试验表明HP0318能够与Hemin结合，且证明其具有血红素氧化酶活性。本研究为进一步研究HP0318在适应性定植中的调控作用机制打下了基础。