本课题主要是以草生欧文氏菌10025A (Erwinia herbicola) ,(简称A25)为出发菌株,按照产冰核活性蛋白的优化的条件发酵培养A25,细菌细胞经超声波破碎,差速高速离心,凝胶过滤等操作,获得了高纯度的冰核蛋白;用此高纯度冰核蛋白免疫新西兰兔制取了高效价的冰核蛋白抗血清,并利用胶体金标记的羊抗兔二抗,在电镜条件下观察到A25中的冰核蛋白的分泌方式,试验结果表明,A25细菌合成、分泌冰核活性蛋白是以小液泡形式向胞外分泌;另外,用丝裂霉素C(MMC)作用A25研究了冰核活性细菌表达冰核活性蛋白的方式,研究也证实了通过MMC的刺激A25菌体细胞,其表达冰核活性蛋白的方式为小液胞分泌方式。根据研究结果,同时结合A25的各种培养特性以及环境条件对其I型冰核活性蛋白合成的影响,提出了I型活性冰核的组装模型及与细胞膜相结合的方式。
英文主题词Ice nucleation protein Type I ice nucleators Immunogold conjugates Analysis of elcetronmicroscopy secret manner.