中文摘要：

为虾类饲料中合理添加铜离子以提高虾类免疫能力、减少环境污染提供理论依据，本项目从细胞和分子水平上系统研究养殖虾类在不同饲料铜离子含量下免疫功能和免疫相关基因表达的调控。通过血细胞状态和功能、免疫酶活性、抗氧化酶活性、转氨酶活性及免疫相关基因表达水平的变化来综合评价不同饲料铜离子含量对虾类免疫功能的影响。本研究摸索确立了利用流式细胞术检测虾类血细胞状态和功能的方法。研究发现水体中高浓度的铜离子刺激了血细胞的活性氧含量上升，胞内游离钙含量上升，诱导了血细胞凋亡，最终导致血细胞总数下降，这可能是高浓度水体铜离子使虾类致死的重要原因之一。添加一定浓度铜离子也会导致离体血细胞活性氧含量和凋亡率的升高。过量的饲料铜离子也会导致虾血细胞活性氧水平的过量上升，诱导细胞凋亡，最终使血细胞总数下降，虾的存活率低下。三种铜处理的结果存在相似性。另外，饲料铜离子影响虾类的免疫功能主要是通过调节铜蛋白（酚氧化酶原和血蓝蛋白）基因的表达，在一定范围内，随着铜添加量的升高，酚氧化酶原系统基因的表达量上调；高于这个添加范围，这些免疫基因的表达量被抑制，可能是过量的铜产生了毒性作用。