枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是一种应用十分广泛的生防菌,能产生多种抗菌物质,其中抗菌蛋白是目前国内外研究较多的抗菌物质,但是目前对于大多数已分离的抗菌蛋白的抑菌机理及其功能结构域还缺少深入的研究。本项目组在前期研究中发现从枯草芽孢杆菌F3菌株分离的鞭毛蛋白具有抗真菌活性。为了确定枯草芽孢杆菌鞭毛蛋白的抗真菌活性及其作用机理,本项目拟进行两方面的研究,一方面克隆F3菌株的鞭毛蛋白基因,构建表达载体并在大肠杆菌中表达,测定表达蛋白的抑菌活性与抑菌浓度;另一方面通过比较具有和不具有抗真菌活性的枯草芽孢杆菌菌株的鞭毛蛋白基因的序列,选取其中的部分氨基酸和序列进行缺失与突变,构建相关的敲除载体并进行突变体蛋白表达,测定突变体蛋白的抑菌活性与抑菌浓度。本研究将明确鞭毛蛋白中抗真菌活性必需或/和重要的结构域,为在植物病害生物防治中利用枯草芽孢杆菌鞭毛蛋白奠定基础。
英文主题词Bacillus subtilis;flagellin;biological function;genetic transformation;