以体外培养成骨细胞为研究对象通过细胞生物学和分子生物学等研究方法研究成骨细胞CTGF mRNA表达时相及雌激素干预后成骨细胞CTGF的表达改变;并对E2下调人成骨细胞CTGF表达的信号转导机制进行研究;采用RNA干扰技术观察阻断CTGF表达对成骨细胞增殖、分化的影响,并检测相应基因的表达水平改变。在此基础上,增加rCTGF对培养人成骨细胞增殖、分化和凋亡的影响及相关基因表达的作用这部分研究。我们的研究表明,成骨细胞CTGF mRNA表达随着培养时间而改变;E2呈明显时间和剂量依赖性下调人成骨细胞CTGF表达;E2通过PKA信号通路下调人成骨细胞CTGF表达。RNA干扰阻断CTGF表达时成骨细胞活力降低,I型胶原、ALP和MMP-1表达下降。rCTGF明显促进人成骨细胞增殖、分化,抑制凋亡,时间剂量性上调I型胶原表达。这些发现为进一步阐明CTGF表达下调在雌激素防止骨丢失过程中的作用和地位;为深入探讨雌激素缺乏致绝经后骨质疏松症的发病机制提供新的研究方向和依据。
英文主题词RNA interference;connective tissue growth factor (CTGF); osteoblast; proliferation; gene expression