中文摘要：

抑制NF-κB是治疗肿瘤和提高其对化放疗敏感性的重要策略。然而，现有的NF-κB抑制剂对肿瘤细胞的作用缺乏选择性，存在效率低和毒副作用高的缺点。我们前期研究发现，疟原虫CSP不但能明显抑制肺癌细胞增殖，而且能阻断其NF-κB活化。WebMOTIF分析发现CSP拥有NLS功能域，推测CSP可能通过竞争抑制的NF-κB的核转位，导致NF-κB的活化受阻。因此，本项目拟在前期已构建的CSP质粒基础上，构建NLS和NLS缺失CSP重组质粒，筛选和鉴定CSP抑制肺癌细胞株A549的NF-κB功能域；然后构建含hTERT启动子的CSP重组腺病毒，在体观察能否特异地抑制种植于裸鼠的肺癌细胞NF-κB的活化和肺癌细胞生长，以及增强对化放疗的敏感性。这可为基于CSP的特异抑制NF-κB的肿瘤靶向治疗策略提供重要的理论基础。

结论摘要：

研究背景抑制NF-κB是治疗肿瘤和提高其对化放疗敏感性的重要策略。然而，现有的NF-κB抑制剂对肿瘤细胞的作用缺乏选择性，存在效率低和毒副作用高的缺点。我们前期研究发现，疟原虫CSP(Circumsprozoites protein)不但能明显抑制肺癌细胞增殖，而且能阻断其NF-κB活化。WebMOTIF分析发现CSP拥有NLS(nuclear location signaling)功能域，鉴于hTERT启动子在肺癌细胞中表达的特异性，因此，本项目拟在前期已构建的CSP质粒基础上，构建NLS和NLS缺失CSP重组质粒，观察CSP能否抑制肺癌细胞生长，并探讨其抑制NF-κB活化分子机制；然后构建含hTERT启动子的CSP重组腺病毒，在体观察能否特异地抑制种植于裸鼠的肺癌细胞NF-κB的活化和肺癌细胞生长，以及增强对化放疗的敏感性。主要研究内容1、探讨CSP能否在体外抑制肺癌细胞的存活增殖和迁移。2、探讨CSP抑制肺癌细胞株A549的分子机制 3、含hTERT启动子的CSP重组腺病毒能否特异阻断NF-κB的活化，抑制种植于裸鼠的肺癌细胞的生长及增强其化放疗敏感性重要结果1、成功构建约氏疟原虫CSP真核表达质粒pFLAG-CMV8-CSP；2、pFLAG-CMV8-CSP重组质粒在SW480细胞和A549细胞中的表达；3、通过Am-Blue细胞增殖与活性检测实验证实CSP能有效抑制A549细胞增殖；4、通过Annexin V-FITC细胞凋亡实验证实CSP促进A549细胞的凋亡；5、成功构建pFLAG-CMV8-CSPΔNLS突变质粒和pFLAG-CMV8-CSP NLS重组质粒；6、通过双荧光素酶实验证实证实CSP通过NLS功能域抑制TNF-α刺激A549细胞后的NF-κB 活化；